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技術(shù)文章

Technical articles

2016
9-6

今日分享:ELISA實(shí)驗(yàn)條件如何選擇
在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇十分重要，今日上海恒遠(yuǎn)就帶您大概了解一下實(shí)驗(yàn)條件的選擇包括哪些：1.固相載體的選擇：載體的種類有多種，如聚苯乙烯，聚氯乙烯和纖維素等，我們通常用的聚苯乙烯塑料微量滴定板，其優(yōu)點(diǎn)在于吸附蛋白的性能較好，操作簡便、用量小、適于大批檢測。2.載體的吸附條件：載體的吸附均為物理吸附，吸附一般要求PH在9.0~9.6之間。時(shí)間、溫度、蛋白的濃度、離子的強(qiáng)度一定要恰到好處。一般采用4℃過一夜。3.酶標(biāo)抗體使用濃度的確定：于聚苯乙烯板中加足夠的抗體包被...
2016
8-30

樣本制備方法之蛋白提取的總原則及注意事項(xiàng)
樣本制備是實(shí)驗(yàn)的*步，也是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵步驟，獲得的蛋白質(zhì)樣品必須均質(zhì)、可溶，并解離成單個(gè)多肽亞基，且盡量減少相互間的聚集，使其zui終僅依賴本身的分子量大小進(jìn)行分離。常見的樣本來源有重組蛋白、細(xì)胞和組織等。今天我司小編與您一起分享關(guān)于蛋白提取的總原則以及注意事項(xiàng)：蛋白提取的總原則和注意事項(xiàng)：1.盡可能提取*或降低樣本復(fù)雜度，只集中提取目的蛋白；2.保持蛋白處于溶解狀態(tài)（通過裂解液的pH鹽濃度，表面活性劑，還原劑等的選擇）；3.提取過程防止蛋白降解、聚集、沉淀、修飾等（低...
2016
8-23

恒遠(yuǎn)分享:酶聯(lián)免疫雙抗夾心法檢測攻略
酶聯(lián)免疫檢測方法有間接法，阻斷法，競爭法，夾心法等。夾心法中，包被的抗體與酶標(biāo)抗體，假如是單抗，理論是不能用一樣的，不外商品化的單抗有可能是混合單抗，識別不同的表位的抗體混在一起，這樣就又可以用一樣的。在今天的技術(shù)下載內(nèi)容中，是恒遠(yuǎn)為您分享酶聯(lián)免疫雙抗夾心法檢測攻略：一、標(biāo)本因素不可忽略1.振蕩提取將提取溶劑加入到裝有樣品的具塞容器中，振蕩，使提取溶劑與容器內(nèi)的樣品充分接觸以深入到樣本組織內(nèi)部，提取待測組分。①振蕩方式：振蕩器上進(jìn)行上下、往返式振蕩、手搖式上下振蕩。②在組織樣...
2016
8-16

儲存ELISA試劑盒有這些講究,拿走不謝
用什么方法儲存ELISA試劑盒，對ELISA操作者來說是非常重要的，因?yàn)閮Υ娣椒ㄖ苯佑绊懙疆a(chǎn)品質(zhì)量。對于開封后試劑盒要以怎樣的方式保存呢？它的有效期是多久？謹(jǐn)記！儲存ELISA試劑盒有這些講究：1.所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請注意，收到試劑盒后請盡快將標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A、檢測溶液B以及96孔板保存于-20℃。2.使用后的試劑盒：剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存，開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕。3.試劑盒內(nèi)酶標(biāo)條可拆卸，按實(shí)驗(yàn)需求可分多次...
2016
8-10

謹(jǐn)記酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的三大要素
我司技術(shù)員結(jié)合整理出了酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的三要素，在測定試劑時(shí)大大提高了結(jié)果的真實(shí)度及其快捷度。為顧客提供了方便，減少了實(shí)驗(yàn)周期，想要實(shí)驗(yàn)真實(shí)可靠，務(wù)必按照此實(shí)驗(yàn)要素執(zhí)行，方可解決實(shí)驗(yàn)中務(wù)必要的麻煩。謹(jǐn)記酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的三大要素：*、實(shí)驗(yàn)因素：所有影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的條件都稱為影響因素，實(shí)驗(yàn)研究的目的不同，對實(shí)驗(yàn)的要求也不同.影響因素有客觀與主觀，主要與次要因素之分。研究者希望通過研究設(shè)計(jì)進(jìn)行有計(jì)劃的安排，從而能夠科學(xué)地考察其作用大小的因素稱為實(shí)驗(yàn)因素；對評價(jià)實(shí)驗(yàn)因素作用大小有一定...
2016
8-2

間接ELISA法OD值相差不大有哪些原因?
做間接ELISA法測試小鼠血清中的IgE抗體，設(shè)空白對照、和陰性對照、陽性血清稀釋倍數(shù)為5千、1萬、10萬、20萬不等，用的是生物素標(biāo)記的羊抗鼠IgE抗體，和親和素的辣根過氧化物酶?？墒墙Y(jié)果除了空白對照孔沒有顏色外，其余各孔全有顏色，而且OD值都相差不大，為什么？下面就由恒遠(yuǎn)為大家總結(jié)出以下幾個(gè)原因?。?）水質(zhì)被金屬離子等污染；防止辦法盡量使用新鮮水或蒸餾水。（2）洗滌不充分，樣品中其它成分殘留或酶殘留；防止辦法洗滌液應(yīng)注滿微孔，充分洗滌。（3）移液頭重復(fù)使用，未洗凈或消毒不...
2016
7-26

恒遠(yuǎn)告訴您造成ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品溢值的原因
ELISA實(shí)驗(yàn)步驟繁瑣，操作者們所犯的問題也各有不同。不久前有位老師向我司吳咨詢問道：為什么ELISA標(biāo)準(zhǔn)品會出現(xiàn)“溢值”的現(xiàn)象呢？對于這個(gè)問題為了方便各位了解，恒遠(yuǎn)特將我司技術(shù)人員的回答整理分析如下：①樣品/標(biāo)準(zhǔn)品不正確稀釋。②孵育時(shí)間/溫度不正確。③在孵育時(shí)為蓋上酶聯(lián)板覆蓋物：在孵育時(shí)需蓋上酶聯(lián)板覆蓋物，以防止液體蒸發(fā)或孵育期間的污染。每個(gè)試劑盒內(nèi)均有足夠數(shù)量的酶聯(lián)板覆蓋物。④檢測波長不正確：要保證分光光度劑的檢測波長是正確的。⑤TMB底物的顯色時(shí)間過長：請監(jiān)控顯色時(shí)間。...
2016
7-19

恒遠(yuǎn)小貼士:一抗的選擇要點(diǎn)和技巧是什么?
（1）單克隆和多克隆抗體的選擇。由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合，就像dao彈地命中目標(biāo)一樣。另一方面，即使是同一個(gè)抗原決定簇，在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體，形成好幾種單克隆抗體混雜物，稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應(yīng)中，一般單克隆抗體特異性強(qiáng)，但親和力相對小，檢測抗原靈敏度相對就低；而多克隆抗體特異性稍弱，但抗體的親和力強(qiáng)，靈敏度高，但易出現(xiàn)非特異性染色（可以通過封閉等避免）。（2）應(yīng)用范圍的選擇。有的一抗只能...

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